HoloMonitor M4采用(yong)全息顯微術（digital holographic microscopy），以激光為(wei)相干(gan)光源，利用干(gan)涉原(yuan)理記錄樣品的相位和振(zhen)幅信息完成(cheng)對細胞的成(cheng)像。因此無(wu)需處理細胞，減少人(ren)為(wei)干(gan)預，真正做到無(wu)標(biao)記無(wu)侵入的同(tong)時一并獲得單(dan)細胞和種群(qun)兩(liang)個層(ceng)面的量化參(can)數與(yu)高(gao)質(zhi)量的影像與(yu)數據。
Figure 1 HoloMonitor M4活細胞成(cheng)像(xiang)系統拍攝(she)的(de)細胞分裂過程(cheng)
Figure 2HoloMonitor M4 活細胞(bao)成像系統(tong)拍攝的傷口愈(yu)合實驗
HoloMonitor M4的六大(da)優(you)勢：
ü無損傷——無需標(biao)記或染色，無光毒性，還原記錄細胞真(zhen)實(shi)的生(sheng)長狀態。
ü體(ti)積小——可(ke)在(zai)培(pei)養箱(xiang)中長期穩(wen)定(ding)運行，在(zai)正常生理狀(zhuang)態下開展延時成像分析。
ü實時性——實時(shi)監(jian)測單個細(xi)(xi)胞，同時(shi)獲得(de)種(zhong)群數(shu)據并提供完整的(de)細(xi)(xi)胞形態學參數(shu)定量。
ü多(duo)數(shu)據——可重新分析(xi)同一樣品或結果以獲得更多(duo)實驗數據(ju)。
ü應用(yong)廣——可用于(yu)細胞(bao)增(zeng)殖(zhi)，分化(hua)，遷徙，凋亡，毒理等(deng)方面的研究。
ü智能化——簡潔實用(yong)的(de)(de)智能圖像(xiang)分析軟件，自動對獲得的(de)(de)圖像(xiang)進行高內涵定量分析。
Figure 3抑(yi)制ER-a后(hou)的(de)乳腺癌細胞 MCF-7的細(xi)胞軌(gui)跡對比圖。 來(lai)源：Gao, Y., Wang, Z., Hao, Q. et al. Loss of ERα induces amoeboid-like migration of breast cancer cells by downregulating vinculin. Nat Commun 8, 14483 (2017).
相(xiang)比于其他常(chang)見(jian)的細胞成像技術，HoloMonitor M4活細(xi)胞成像系統不需要對(dui)細(xi)胞進行(xing)染色或標記(ji)，避免了對(dui)細(xi)胞的(de)不必要傷害，因此(ci)細(xi)胞可(ke)以(yi)被重(zhong)復(fu)利用(yong)與(yu)下游研究，提(ti)高了細(xi)胞的(de)利用(yong)率，節(jie)省(sheng)了時(shi)間，經費以(yi)及(ji)珍貴的(de)細(xi)胞。同時(shi)，實驗(yan)結果可(ke)以(yi)用(yong)HoloMonitor M4的(de)其他應用(yong)重(zhong)新分析來獲(huo)得新的(de)數據(ju)。
HoloMonitor M4活(huo)細胞成像儀配備有功能強大的(de)圖像分(fen)析軟件App suite，使用簡單明(ming)了(le)，包(bao)含了(le)精確(que)的圖像處理模塊，不(bu)僅能提供(gong)細(xi)胞(bao)的種(zhong)(zhong)群(qun)信息(xi)如數量、細(xi)胞(bao)融合度、運(yun)(yun)動遷移距離等，也可以提供(gong)單個細(xi)胞(bao)的多達(da)30多種(zhong)(zhong)的形態表征和(he)運(yun)(yun)動參數，包(bao)括面積、厚度、體積、不(bu)規則度等。
Figure 4 利用細胞表(biao)面粗糙度來(lai)區分不同的細胞狀態(tai) 來源：Croft, L.V., Mulders, J.A., Richard, D.J., O’Byrne, K. (2019). Digital Holographic Imaging as a Method for Quantitative, Live Cell Imaging of Drug Response to Novel Targeted Cancer Therapies. In: Batra, J., Srinivasan, S. (eds) Theranostics. Methods in Molecular Biology, vol 2054. Humana, New York, NY.
HoloMonitor的相關應用(yong)
· 細胞形態(tai)（多達30種(zhong)動態(tai)參數(shu)）
· 深度單細(xi)胞追蹤研究(jiu)
· 細胞(bao)遷移，運(yun)動(dong)與單細胞(bao)跟蹤
· 細胞劃痕實(shi)驗(yan)|細胞趨化(hua)
· 細胞增殖(zhi)
· 細胞生(sheng)長|分(fen)裂|周期
· 細胞分化
· 藥物效應
· 細(xi)(xi)胞毒性|細(xi)(xi)胞凋亡
· 細胞計數
· 細胞質控(QC)
Figure 5 HoloMonitor M4活細胞成(cheng)像儀的應(ying)用
HoloMonitor? M4
· 光源: 外(wai)接激光
· 樣品照度: 635 nm, 0.2 mW/cm2
· 物鏡(jing): 20x
· 橫向分辨率: 1 μm
· 視野范(fan)圍(wei): 567 μm × 567 μm
· 工(gong)作距離: 0.5 – 2 mm
· 自動(dong)聚(ju)焦范圍(wei): 1.5 mm
· 捕獲速度: 1 圖(tu)像/s
· 成像(xiang)大小: 1024 × 1024 pixels
· 載物臺移動空(kong)間: 100×70×10 (x×y×z)
· 載物臺精確度: 5 μm
· 產品(pin)尺(chi)寸: 290×200×190 mm (長×寬×高)
· 工作空間: 400×270×190 mm (長×寬×高)
· 重量(liang): 5.15 kg
電腦(nao)要求
· 操作系統: Windows 10, 64–bit
· 處理器: Intel Core i7 (第八代)
· 儲存: 16 GB RAM (最少8 GB)
· 硬盤: 512 GB SSD (最少256 GB)
· 顯卡: Full HD (min 1920×1080)
· 其他: 2 個USB接口
樣(yang)品與(yu)工作環境
· 細胞: 單層真核貼壁(bi)細胞
· 培養皿規格(ge): 6-, 24-, 96-well, Petri, IBIDI
· 運行溫度: 10-40° C
· 運行濕度: 最大95 %
